碳源和酶試驗

時間：2023-03-25 14:11:12來源：food欄目：食品快速檢測閱讀：

碳源和酶試驗

[db:作者] / 2022-11-29 00:00

碳源利用試驗

有的細菌如產氣桿菌，能利用枸櫞酸鹽為碳源，因此，能在枸櫞酸鹽培養基上生長，并分解構櫞酸鹽使培養基變為堿性。培養基中的溴麝香草繼豬示劑由綠色變為深藍色。不能利用枸櫞酸鹽為碳源的細菌，在該培養基上不生長，培養基不變色。碳源利用試驗用于腸桿菌種中菌屬間的鑒定，埃希氏菌屬、志賀氏菌屬、愛德華氏菌屬、摩根氏菌屬為陰性，其他菌屬多為陽性。

酶試驗

1.硝酸鹽還原試驗有些細菌具有還原硝酸鹽的能力，可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽、氨或氮氣等。亞硝酸鹽的存在可用硝酸試劑檢驗。

試驗方法：將磺胺酸冰醋酸溶液和a-萘胺乙醇溶液各0.2mL等量混合，取混合試劑約0.1ml加于液體培養物或瓊脂斜面培養物表面，10min內呈現紅色即為陽性。

用a-萘胺進行試驗時，陽性反應產生的紅色消退得很快，加入后應立即判定結果。進行試驗時必須有未接種的培養基管作為陰性對照。a-萘胺具有致癌性，使用時應加注意。

2.尿素酶試驗有些細菌能產生尿素酶，將尿素分解產生2個分子的氨，使培養基pH升高，酚紅指示劑變紅，見彩圖3。

試驗方法：挑取待測菌接種于液體培養基中，搖勻，于(36±1)℃培養10min、60min和120min，分別觀察結果；或涂布并穿刺接種于瓊脂斜面，不要到達底部，留底部作變色對照。培養2h、4h和24h分別觀察結果，如陰性應繼續培養至第4天作最終判定。

3.氧化酶試驗氧化酶即細胞色素氧化酶，氧化酶先使細胞色素c氧化，然后此氧化型細胞色素c再使對苯二胺氧化，產生顏色反應。

試驗方法：在瓊脂斜面培養物上或瓊脂平板菌落上滴加試劑1～2滴，或用接種環將菌落涂布在氧化酶試紙上，陽性30s內變藍色，陰性者無顏色改變。注意避免含鐵物質。

4.明膠液化試驗有些細菌具有明膠酶(亦稱類蛋白水解酶)，能將明膠先水解為多肽，又進一步水解為氨基酸，失去凝膠性質而液化。

試驗方法：挑取18～24h培養物，以較大量穿刺接種于明膠高層約2/3深度或點種于平板培養基。于20～22℃培養7～14d。明膠高層亦可培養于(36±1)℃。每天觀察結果，若因培養溫度高而使明膠本身液化時應不加搖動，靜置冰箱中待其凝固后，再觀察其是否被細菌液化，如確定被液化，即為試驗陽性。平板試驗結果的觀察為在培養基平板點種的菌落上滴加試劑，若為陽性，10～20min后，菌落周圍應出現清晰帶環。否則為陰性。

5.凝固酶試驗致病性葡萄球菌可產生兩種凝固酶：一種是結合凝固酶，結合在細胞壁上，使血漿中的纖維蛋白原變成纖維蛋白而附著于細菌表面，發生凝集，可用玻片法測出；另一種是分泌至菌體外的游離凝固酶。作用類似凝血酶原物質，可被血漿中的協同因子激活變為凝血酶樣物質，而使纖維蛋白原變成纖維蛋白，從而使血漿凝固，可用試管法測出。

文章來源：《農產品質量安全檢測》

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